RESUMO
Antecedentes: En la isquemia/reperfusión (IR) miocárdica es relevante la pérdida de cardiomiocitos por apoptosis. En estos, los hemicanales (HC) permiten el ingreso de sustancias proapoptóticas durante la IR. Boldina (B), compuesto extraído del Peumus boldus, ha demostrado ser antioxidante y bloquear los HC. Objetivo: Determinar el efecto de boldina sobre la apoptosis de cardiomiocitos de ratas sometidas a IR. Métodos: Ratas macho de 200 g de peso se sometieron a ligadura reversible de la arteria coronaria izquierda por 30 minutos (I) y posterior reperfusión (R) por 24 horas post I. Un subgrupo de estos animales recibió una dosis de boldina intraventricular (IR+B, 40 mg/Kg) y luego dos dosis vía gavage (75 mg/Kg) a los 30 y 60 minutos post-R. Como controles se usaron ratas sham con operación ficticia, que recibieron igual tratamiento. Se determinaron las masas corporal (MC) y cardiaca relativa (MCR) y presión arterial sistólica (PAS). Porcentaje de cardiomiocitos apoptóticos (CMAP), otras células apoptóticas (OCAP) y total de células apoptóticas (TCAP) se determinó por TUNEL. La activación de metaloproteinasas (MMPs) 2 y 9 se determinó por zimografía y el mRNA de MCP-1 por RT-PCR. Resultados: La boldina no modificó la MC y la MCR. Sin embargo, disminuyó significativamente la PAS así como el por cientoCMAP y el por cientoTCAP en el grupo IR+B versus IR (CMAP 69 +/- 1,5 vs 44 ± 0,4, p=0,016, TCAP 71 +/- 2,4 vs 57 +/- 1,5, p=0,016). No se encontraron diferencias en el OCAP, actividad de MMPs y en los niveles de mRNA de MCP-1. Conclusiones: Boldina disminuyó la PAS y la apoptosis de cardiomiocitos post IR. Su efecto no es mediado por modificaciones en la actividad de MMPs y expresión génica de MCP-1.
Background: Ischemia / reperfusion (IR) is relevant in the myocardial loss of cardiomyocytes through apoptosis. During IR, hemi channels (HC) allow the entry of proapoptotic substances to the cell. Boldine, a compound extracted from Peumus boldus, has proven to be antioxidant and to block HC. Objective: To determine the effect of boldine on cardiomyocyte apoptosis in rats subjected to IR. Methods: Male rats, body weight (BW) 200 g, were subjected to reversible ligation of the left coronary artery for 30 minutes (I) and subsequent reperfusion (R) for 24 hours. A subset of these animals (IR+B) received an intraventricular dose of boldine (40mg/kg) and then two doses via gavage (75 mg/kg) at 30 and 60 minutes post-R. Sham operated rats (S) receiving the same treatment were used as controls. We determined body weight (BW), relative heart mass (RHM) and systolic blood pressure (SBP). Percentage of apoptotic cardiomyocytes (CMAP), other apoptotic cells (OCAP) and total apoptotic cells (TCAP) were determined by TUNEL. Activation of metalloproteinases (MMPs) 2 and 9 was determined by zymography and MCP-1 mRNA levels by RT-PCR. Results: Compared to IR alone, IR+Boldine did not change BW or RCM, but significantly decreased PAS, TCAP (71 +/- 2.4 vs 57 +/- 1.5, p=0.016) and CMAP (69 +/- 1.5 vs 44 +/- 0.4, p=0.016). No difference was observed in the OCAP, MMPs activity and MCP-1 mRNA levels. Conclusions: Boldine decreased SBP and post-IR cardiomyocyte apoptosis without effect on other cells. This effect was not mediated by MMPs activity or MCP-1 gene expression.